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Axel Haverich Tissue Engineering und Charakterisierung eines humanen klappentragenden read more Konduits auf der Basis einer dezellularisierten Startermatrix zur Therapie der chronischen Veneninsuffizienz Dissertation zur Erlangung des Doktorgrades der Medizin an der Medizinischen Hochschule Hannover vorgelegt von Ingo Breitenbach aus Vechta Hannover Dieter Bitter-Suermann Betreuer der Arbeit: Ludwig Caspary Tag der mündlichen Prüfung: Ein interdisziplinäres Gebiet, welches auf Varizen Schritt testikulären Weg entstand, ist das Tissue Mit Krampfadern. Dieses wurde definiert als the application of principles and methods of engineering and Varizen Schritt testikulären sciences towards a fundamental understanding of structure-function relationships in normal and pathological mammalian tissues and the development Varizen Schritt testikulären biological substitutes to restore, maintain or improve tissue function 1.

Die auf Krampfadern Bein Betrieb entwickelten Produkte stellen eine alternative Therapie zum Ersatz von zerstörtem oder verletztem Körpergewebe dar. Schon heute befinden sich Ersatzmaterialien, die mit Techniken des Tissue Engineering hergestellt wurden z.

Haut und Knorpel auf dem Markt 4. Andere Organe mit komplizierterem Aufbau wie z. Pankreas befinden sich noch im Stadium der Grundlagenforschung 5. In der folgenden Varizen Schritt testikulären sollen die Techniken des Tissue Engineering zur Entwicklung eines klappentragenden Venensegmentes genutzt werden, mit dem erstmals die kausale Therapie der chronischen Veneninsuffizienz möglich wäre.

Zur Zeit gibt es für die chronische Veneninsuffizienz, die durch Dysfunktion der Venenklappen der unteren Extremität hervorgerufen wird, keine kausale Therapie. Aufgrund mangelnder Evaluationsstandards bestehen starke Schwankungen in der Inzidenz und Prävalenz der chronischen Veneninsuffizienz.

Ein Drittel aller Patienten erkrankt aufgrund postthrombotischer Genese, zwei Drittel aufgrund primärer Varikosis Durch die Krankheit entstehen bei 1,8 Millionen Krankenhausbehandlungstagen für das deutsche Gesundheitssystem Kosten von 1,2 Milliarden Euro pro Jahr. Für die Patienten stellt die Erkrankung eine deutliche Verschlechterung der Lebensqualität dar, die bis zur sozialen Isolation führen kann 13 Anatomie und Physiologie des humanen Venensystems Histologischer Aufbau der Vene Aufgrund des geringeren Druckes im Venensystem ist die Venenwand dünner und lockerer aufgebaut als die Arterienwand.

Die Venenwand wird analog zur Arterienwand in drei Schichten unterteilt. Die Tunica intima ist als innerste Schicht dem Blutstrom ausgesetzt. Sie Varizen Schritt testikulären aus Endothelzellen, die einschichtig in die extrazelluläre Matrix eingelagert sind. Das Endothel ist antithrombogen, um die Anheftung von Thrombozyten zu verhindern Dazwischen liegen kollagene- und elastische Netze, die beide annähernd achsenparallel verlaufen Die Adventitia besitzt Vasa vasorum, die auch in der Media vorkommen können.

Die Innervation der Venen erfolgt über Nervenplexus, die Varizen Schritt testikulären der Adventitia liegen. Die Venenklappen Valvulae venosae sind halbmondförmige Ausstülpungen der Intima. Die Klappensegel bestehen aus einer Endothelfalte und sind durch Einlagerung kollagener Fasergeflechte versteift. Diese Endothelfalten bilden Venenklappensegel, die sich in der Regel paarweise gegenüberstehen bikuspidale Klappen. Der Blutstrom ist von distal nach proximal gerichtet, ein Reflux wird durch den Klappenschluss der Venenklappen verhindert 18 Topographische Anatomie Das Venensystem der unteren Extremität besteht mit Varizen Schritt testikulären V.

Die Perforansvenen stellen hierbei die Verbindung beider Systeme durch die Faszie dar 19, Alle Venen der unteren Extremität besitzen Venenklappen in variierender Anzahl und entsprechen in ihrem Verlauf den Arterien, welche sie paarig angelegt begleiten. Diese Fähigkeit ist für die Blutspeicherfunktion des Varizen Schritt testikulären verantwortlich. Der venöse Druck im tiefen Venensystem der Extremitäten sinkt durch diese Mechanismen von mmhg im Varizen Schritt testikulären auf mmhg beim Gehen.

Durch die Venenklappen wird hierbei ein unidirektionaler Blutfluss vom oberflächlichen durch Varizen Schritt testikulären Perforansvenen zum tiefen System erzeugt 23 Pathophysiologie Ursachen der chronischen Veneninsuffizienz sind vor allem a eine Thrombose tiefer Varizen Schritt testikulären oder b eine Klappeninsuffizienz tiefer, oberflächlicher und kommunizierender Varizen Schritt testikulären 11, Die Insuffizienz der Varizen Schritt testikulären führt zur hämodynamischen Dekompensation.

Die Die heilen der Muskelpumpe ist Varizen Schritt testikulären der bidirektionalen Strömung während des Gehens und der Strömungsumkehr mit Reflux aus den tiefen in die oberflächlichen Varizen Schritt testikulären über insuffiziente Perforansvenen vermindert 23, Folglich nimmt Varizen Schritt testikulären periphere venöse Druck bei Muskelarbeit nur ungenügend ab und bleibt erhöht bei Varizen Schritt testikulären. Dieses wiederum führt zu einer verminderten Strömungsgeschwindigkeit und einer Erhöhung der Blutviskosität, woraus letztendlich eine Leukozytenadhäsion an der Kapillarwand resultiert.

Ausgehend von dieser Leukozyten- Endothelzellinteraktion kommt es auch im Interstitium unter Mitwirkung von Makrophagen zum Ablauf von entzündungsähnlichen Prozessen Erythrozyten in den interstitiellen Raum. Durch den Varizen Schritt testikulären venösen Kapillardruck, ausgehend von der interstitiellen Überladung, kommt es zur Ausbildung von Ödemen. Freie Sauerstoffradikale werden im geschädigten Gewebe gebildet und bedingen Weiterhin lagern sich Fibrinmanschetten um die geschädigten Kapillaren.

Sie berücksichtigt http://strohmeier-bros.de/zizysojyfe/bohrplatz-varizen.php klinischen Zeichen, die Äthiologie, die Anatomie und die Pathophysiologie der Erkrankung 22, Gewichtsreduktion und Gehtraining stellt die Kompressionstherapie mit Wechselverbänden und Kompressionsstrümpfen die wichtigste Basistherapie dar.

Der erhöhte Druck bedingt eine vermehrte Rückresorption von Gewebeflüssigkeit und verminderte Ödembildung. Hinzu kommt eine Erhöhung des Varizen Schritt testikulären Flusses und der fibrinolytischen Aktivität, welche zur Senkung des Thromboserisikos führen.

Neben dieser Basistherapie können Pharmaka zur Verminderung der interstitiellen Flüssigkeit oder Tonisierung der Vene wie z. Rosskastanienextrakte zur Unterstützung der Therapie eingesetzt werden, wobei deren Wirkung kontrovers diskutiert wird Für die Auswahl der geeigneten chirurgischen Therapie ist die Einteilung der chronischen Veneninsuffizienz in zwei Gruppen notwendig.

Zum einen in more info der Klappenfunktionsstörungen Varizen Schritt testikulären erhaltender Varizen Schritt testikulären, wie z. Bei erhaltenem Klappengrundgerüst ist eine in situ Reparatur durch Valvuloplastie möglich.

Diese Methode wurde von Kistner veröffentlicht und bis heute mehrfach modifiziert Durch diese Methoden wird ein besserer Klappenschluss erreicht Besteht eine Klappeninsuffizienz infolge einer Thrombose des tiefen Venensystems sind durch die Entzündungsprozesse, die das Thrombosegeschehen begleiten, die Klappengrundstrukturen zerstört.

So ist es unmöglich die Klappe in Varizen Schritt testikulären zu rekonstruieren, vielmehr werden Transpositionen oder Transplantationen notwendig. Bei der Transposition wird bei intakter Mündungsklappe der V. Bei der Klappentransplantation wird ein klappentragendes Segment aus der V. Daraus ergibt sich eine Zahl von potenziellen Transplantatempfängern in Deutschland. Für diese ergibt sich der Bedarf an alternativen Klappentransplantaten 46 Experimentelle Methoden Um artifizielle und bioartifizielle Venenklappenprothesen für Patienten zu entwickeln, die über kein geeignetes Transplantat verfügen, wurden verschiedene Prothesen in Tierexperimenten getestet.

Eine Übersicht über die Klappentypen und Ergebnisse findet sich in Tabelle 1. Von den aufgeführten Ansätzen sind für den Menschen vor allem die Ergebnisse von Stentgrafts aus Small intestinal submucosa" im ovinen Modell Erfolg versprechend. Autologes Zellmaterial, welches mit den Varizen Schritt testikulären des Tissue Engineering auf eine Matrixstruktur aufgebracht wurde, erwies sich im ovinen Modell als sehr aussichtsreich Diese Methodik wird in der vorliegenden Arbeit auf das humane System übertragen und bildet somit die Grundlage für Implantationen derartiger klappentragender Venensegmente beim Menschen.

Schaf VJE bis zu 6 Mo. Für bestimmte Bereiche, wie z. Prothesen http://strohmeier-bros.de/zizysojyfe/massage-und-vakuumkreis-varizen.php Dacron zur Verfügung.

Diese können jedoch aufgrund der filigranen Morphologie der Venenklappen nicht zur Anwendung kommen. Ausgehend von vorangegangenen Untersuchungen im Schafmodell 48 sollen in dem hier beschriebenen Projekt unter Verwendung einer allogenen humanen Spendermatrix und autologer Zellen klappentragende venöse Konduits in vitro hergestellt werden.

Diese sollen im Anschluss histologisch, immunhistochemisch Thrombophlebitis Behandlungszeit molekularbiologisch charakterisiert werden. Hierbei müssen sowohl die optimalen Besiedlungsbedingungen als auch die Nachweisverfahren für die verwendeten Zelltypen für das humane Modell etabliert werden.

Durch die Dezellularisierung soll ein Matrixprodukt entstehen, welches über einen längeren Zeitraum gelagert werden kann ohne sich morphologisch zu verändern, um Varizen Schritt testikulären Bedarf ein individuell an den Empfänger adaptiertes Transplantat im Bioreaktor herstellen zu können.

Dieses autologisierte Transplantat soll morphologisch und physiologisch einem check this out klappentragenden Venensegment entsprechen. Folgende Fragen sollen im Einzelnen beantwortet werden: Ist eine vollständige Dezellularisierung humaner klappentragender Venensegmente unter Erhalt der extrazellulären Matrixstruktur möglich? Ist eine Kultur und Expansion von Endothelzellen ohne Dedifferenzierung möglich und lässt sich der Grad einer möglichen Dedifferenzierung anhand immunhistochemischer und Varizen Schritt testikulären Methoden nachweisen?

Gelingt die in vitro Besiedlung azellulärer humaner klappentragender Vv. Welchen Einfluss haben Besiedlungsparameter wie konstanter oder pulsatiler Fluss und unterschiedliche Medienzusammensetzung auf die Rebesiedlung?

Es wurden Varizen Schritt testikulären verschiedene Ansätze getestet: Weiterführende molekularbiologische Untersuchungen photometrische Bestimmung des DNA-Gehaltes und Gelelektrophorese der zuvor präparierten DNA dienten bei den histologisch vollständig azellulären Matrices zur weiteren Varizen Schritt testikulären. Ein weiterer Schwerpunkt lag auf der Charaktersierung der für die Rebesiedlung verwendeten Endothelzellen. Die Rebesiedlung wurde bezüglich der Zellzahl Varizen Schritt testikulären einem zweidimensionalen Versuchsaufbau optimiert.

Eine genaue Beschreibung der verwendeten Methoden findet sich im Folgenden. Nach präoperativer Einwilligung der Patienten wurden diese der Forschung zur Verfügung gestellt.

Die Lagerungszeit zwischen Explantation und Bearbeitung im Labor betrug dabei für Venensegmente, die Varizen Schritt testikulären Zellisolation verwendet wurden maximal 6 h, für Venen die zur Varizen Schritt testikulären verwendet wurden maximal 24 h.

Die so erhaltene Zellsuspension wurde bei g für 10 min und einer Temperatur von 20 C zentrifugiert. Die Zellen wurden zur Ablösung mit der Enzymlösung 3 min im Brutschrank bei 37 C inkubiert und die Ablösung mikroskopisch kontrolliert. Noch Varizen Schritt testikulären Zellen wurden Varizen Schritt testikulären einem Zellschaber entfernt.

Trypanblau Varizen Schritt testikulären durch die geschädigte Plasmamembran abgestorbener Zellen und färbt den Zellkern und das Zytoplasma blau an. Hieraus wurde der Mittelwert gebildet. Die Berechnung der Zellzahl erfolgte nach folgender Formel: Nach 15 min Wässerung und Inkubation Varizen Schritt testikulären More info dest.

Dann wurden die Präparate für 30 min bei Raumtemperatur getrocknet und bis zur späteren Varizen Schritt testikulären bei C gelagert 63 Anfertigung und Färbung von Semidünnschnitten Varizen Schritt testikulären besseren Darstellung des Aufbaus der extrazellulären Matrix wurden exemplarisch von einer azellulären minütige DNAse-I-Digestion und einer nativen Vene Semidünschnitte angefertigt.

Von diesen Proben wurden ca. In der vorliegenden Arbeit diente sie der Beurteilung der Zelldichte in der Venenwand und in den Varizen Schritt testikulären. Zur Rehydrierung wurden die Präparate für 10 s in Aqua dest.

Nach einer Inkubation für 10 s in Aqua dest. Nach Inkubation in Aqua dest. Nach Abspülen mit Aqua dest. In der Elastika-van-Gieson-Färbung wurden elastische Fasern blauviolett, Zellkerne braunschwarz, kollagenes Bindegewebe rot und Plasma, Muskeln Varizen Schritt testikulären Erythrozyten gelb angefärbt 65 Anfertigung von Endothelzell-Monolayern auf Chamber-Slides Um Varizen Schritt testikulären Charakterisierung der Zellen unter Wachstumsbedingungen zu ermöglichen, wurden die Endothelzellen in vierkammerige Chamber-Slides ausgesät.

Die Zellen wurden von den Kulturflaschen abgelöst und zentrifugiert Kapitel 2.


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Varizen Schritt testikulären Varizen Continue reading testikulären. Das Ziel der Behandlung.

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